發(fā)布時(shí)間: 2023-01-05 點(diǎn)擊次數(shù): 594次
分子生物試劑在生物科研試劑占比大接近51%,各類生物制品的研發(fā)及生產(chǎn)離不開對(duì)酶、抗原、抗體等共性的功能性蛋白進(jìn)行定向改造與進(jìn)化,功能性蛋白的下游應(yīng)用領(lǐng)域非常廣泛。
用于細(xì)胞生物學(xué)中的常見分子生物試劑類別如下:
1.蛋白酶抑制劑
廣義上指與蛋白酶分子活性中心上的一些基團(tuán)結(jié)合,使蛋白酶活力下降,甚至消失,但不使酶蛋白變性的物質(zhì)。在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)常需要破碎細(xì)胞提取蛋白質(zhì),這一過(guò)程同時(shí)可釋放出蛋白酶,這些蛋白酶需要迅速地被抑制以保持蛋白質(zhì)不被降解。在蛋白質(zhì)提取過(guò)程中,需要加入蛋白酶抑制劑以防止蛋白水解。常用的蛋白酶抑制劑包括PMSF、胃蛋白酶抑制劑、亮抑蛋白酶肽、胰蛋白酶抑制劑和蛋白酶抑制劑混合使用。各種蛋白酶對(duì)不同蛋白質(zhì)的敏感性各不相同,因此在試驗(yàn)中需要調(diào)整各種蛋白酶的濃度。由于蛋白酶抑制劑在液體中的溶解度極低,尤其應(yīng)注意在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑時(shí)應(yīng)充分混勻以減少蛋白酶抑制劑的沉淀。
2.激酶調(diào)節(jié)劑
激酶調(diào)節(jié)劑一般指蛋白激酶調(diào)節(jié)劑,蛋白激酶,即蛋白質(zhì)磷酸化酶,是一類重要的催化蛋白質(zhì)磷酸化反應(yīng)的酶。在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的過(guò)程中有兩個(gè)作用:一是通過(guò)磷酸化調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)活性;二是通過(guò)蛋白質(zhì)的逐級(jí)磷酸化,使信號(hào)逐級(jí)放大,從而引起細(xì)胞反應(yīng)。蛋白激酶的種類比較多,大部分都是屬于重要的信號(hào)傳導(dǎo)分子,其中對(duì)生物學(xué)功能影響比較大的有蛋白激酶G、蛋白激酶C、蛋白激酶a、蛋白激酶b、MAPK等。
蛋白激酶活性異常是導(dǎo)致腫瘤發(fā)生、生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的重要原因之一。因此以蛋白激酶作為抗癌靶點(diǎn),研發(fā)新型抗腫瘤藥物,已經(jīng)成為藥物研發(fā)領(lǐng)域中最重要的研究方向之一,蛋白激酶調(diào)節(jié)劑也成為頗具潛力的抗腫瘤候選藥物。
3.細(xì)胞周期調(diào)節(jié)劑
細(xì)胞周期是細(xì)胞生命活動(dòng)的基本過(guò)程,它控制著細(xì)胞從靜止期轉(zhuǎn)向生長(zhǎng)增殖期。細(xì)胞周期進(jìn)程的實(shí)現(xiàn)有賴于各級(jí)調(diào)控因子對(duì)細(xì)胞周期精確而嚴(yán)密的調(diào)控,細(xì)胞周期蛋白依賴激酶和細(xì)胞周期蛋白是整個(gè)細(xì)胞周期調(diào)控機(jī)制中的核心分子。
細(xì)胞周期調(diào)控異常與細(xì)胞癌變密切相關(guān),90%以上的腫瘤,尤其是膠質(zhì)瘤和軟組織肉瘤中激酶都有過(guò)度表達(dá)。