Chris Gardiner等2016發(fā)表的調(diào)查報(bào)告有報(bào)道細(xì)胞培養(yǎng)上清液是經(jīng)常用來提取外泌體的樣本來源,除了細(xì)胞上清,其他最常見的體液是血漿(47%)、血清(22%)、尿液(14%)、腦脊液(8%)和乳汁(5%)。
以目前外泌體的分離手段很難獲得十分純凈而且單一的外泌體樣品,也沒有任何一個(gè)單一實(shí)驗(yàn)可以確定外泌體的存在。根據(jù)國際細(xì)胞外囊泡協(xié)會(huì)發(fā)表的指導(dǎo)手冊(cè)《MISEV 2018》,外泌體特征鑒定通過NTA測(cè)粒徑分布、TEM電鏡分析形態(tài)、WB檢測(cè)標(biāo)志蛋白三項(xiàng)來驗(yàn)證。NTA分析樣品中外泌體的粒徑分布和顆粒濃度,TEM電子顯微鏡來觀察樣品中外泌體的形態(tài)特征,WB檢測(cè)外泌體標(biāo)志蛋白。
我們的外泌體試劑盒系列(微泡提取(ME 試劑盒))均用于從復(fù)雜混合物中分離細(xì)胞外囊泡 (EV)。通過使用高度特異性的熱休克蛋白 (HSP) 結(jié)合 Vn96 肽,可以從尿液或血漿中去除 EV以及細(xì)胞培養(yǎng)基。
ME™ 套件:按樣品類型進(jìn)行優(yōu)化。
與尿液或培養(yǎng)基樣本中分離 EV 相比,從血漿樣本中分離 EV 一直面臨著特別的挑戰(zhàn)。我們投入了大量精力來試驗(yàn)和完善協(xié)議,以針對(duì) Vn96 平臺(tái)進(jìn)行優(yōu)化。在這項(xiàng)研究中,我們注意到樣本類型的行為之間存在足夠的差異,因此我們認(rèn)為擁有兩種不同版本的試劑盒是最有意義的:一種用于尿液或培養(yǎng)基樣本,另一種用于血漿。每個(gè)試劑盒都使用相同的經(jīng)過驗(yàn)證的 Vn96 試劑,但推薦的方案略有不同。我們還開發(fā)了一種用于血漿樣品的新樣品稀釋緩沖液,可大大提高結(jié)果的清晰度。
Biosynth 品牌下的外泌體試劑盒
ME套件(血漿) 貨號(hào)ME-020P
ME套件(尿液/培養(yǎng)基) 貨號(hào)ME-020
泛酸羧基末端酯酶L5,人,重組 貨號(hào)ENZ-097