答:原代細(xì)胞直接源自組織,一旦培養(yǎng),原代細(xì)胞的壽命是有限的。原代細(xì)胞是理想的,因?yàn)樗鼈儽A袅梭w內(nèi)觀察到的許多標(biāo)記。細(xì)胞系是不斷生長(zhǎng)和復(fù)制并經(jīng)歷遺傳轉(zhuǎn)化的細(xì)胞群,具有無限的生長(zhǎng)潛力。出于醫(yī)學(xué)和/或研究目的,細(xì)胞系已在體外維持。細(xì)胞系可以通過非常大量的傳代培養(yǎng)進(jìn)行培養(yǎng),并且在非常高的傳代次數(shù)下可能會(huì)發(fā)生進(jìn)一步的基因型/表型變化。一般來說,細(xì)胞系缺乏體內(nèi)觀察到的許多標(biāo)記,并且也顯示出與原代細(xì)胞非常不同的標(biāo)記譜。
A. 細(xì)胞類型可以通過多種方式確認(rèn)。細(xì)胞形態(tài)學(xué)非常重要,可以幫助我們識(shí)別正確的細(xì)胞。此外,我們的質(zhì)量控制部門使用免疫熒光來確認(rèn)特定細(xì)胞類型的識(shí)別標(biāo)記的存在。免疫熒光也可用于識(shí)別污染細(xì)胞。
答:我們保存所有人類和動(dòng)物原代細(xì)胞的記錄。如果您有特定要求(年齡和/或性別),請(qǐng)?jiān)谟嗁?gòu)前聯(lián)系我們的客戶服務(wù)部門。
答:人類白細(xì)胞抗原 (HLA) 分型是一種確定一個(gè)人的組織與另一個(gè)人的組織匹配程度的方法。我們目前不在 ScienCell 研究實(shí)驗(yàn)室對(duì)此進(jìn)行測(cè)試。
答:原代細(xì)胞永遠(yuǎn)不會(huì)是 100% 純的,但是,我們會(huì)盡力獲得盡可能純的細(xì)胞??偸谴嬖谖廴炯?xì)胞。
答:強(qiáng)烈推薦具有在無菌條件下使用層流罩工作的經(jīng)驗(yàn),并且具有使用其他細(xì)胞類型的經(jīng)驗(yàn)是有利的。如果您是細(xì)胞培養(yǎng)的初學(xué)者或想建立細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室,我們可以為您提供幫助。請(qǐng)聯(lián)系我們的細(xì)胞培養(yǎng)專家。
A. 收到包裹后,立即將冷凍保存的細(xì)胞從干冰運(yùn)輸容器轉(zhuǎn)移至液氮中??焖?gòu)倪\(yùn)輸容器轉(zhuǎn)移到液氮中,以防止細(xì)胞解凍。請(qǐng)勿將細(xì)胞儲(chǔ)存在 -20°C 或 -80°C 下,因?yàn)檫@會(huì)對(duì)細(xì)胞造成不可逆轉(zhuǎn)的損壞。
答:我們不建議通過離心細(xì)胞來去除 DMSO 殘留物。離心過程對(duì)細(xì)胞的危害可能比 DMSO 殘留物更大,特別是如果使用不適當(dāng)?shù)母咚佟.?dāng)您鋪板細(xì)胞時(shí),DMSO 將在培養(yǎng)基中充分稀釋。例如,如果將整個(gè)冷凍管(1 毫升)細(xì)胞放入裝有 15 毫升培養(yǎng)基的 T-75 燒瓶中,則 DMSO 濃度將低于 0.67% (v/v)。如果以 5000 - 10,000 個(gè)細(xì)胞/cm2 鋪板細(xì)胞,DMSO 的濃度會(huì)更低。
我們建議使用 37°C、5% CO 2培養(yǎng)箱培養(yǎng)來自 ScienCell 的所有原代細(xì)胞。所有 ScienCell 培養(yǎng)基都需要 5% CO 2來維持細(xì)胞的最佳 pH 值。
A. 注意:詳細(xì)說明請(qǐng)參閱電池產(chǎn)品表。
從液氮中取出一小瓶細(xì)胞,注意保護(hù)手和眼睛。
將小瓶上的蓋子擰松 1/4 圈 10 秒,以釋放可能滯留在螺紋中的液氮,然后重新擰緊蓋子。
將冷凍小瓶放入 37°C 水浴中。握住并輕輕旋轉(zhuǎn)小瓶,直至內(nèi)容物全部解凍。迅速?gòu)乃≈腥〕鲂∑?,?70% 乙醇擦拭,然后轉(zhuǎn)移至無菌區(qū)。
小心地取下蓋子,不要接觸內(nèi)螺紋。輕輕地將小瓶中的內(nèi)容物重新懸浮并分配到含有培養(yǎng)基的平衡的聚-L-賴氨酸或纖連蛋白包被的培養(yǎng)容器中(請(qǐng)參閱產(chǎn)品表上列出的具體說明)。
蓋上培養(yǎng)容器的蓋子或蓋子,輕輕搖動(dòng)容器以使細(xì)胞均勻分布。如有必要,松開蓋子以進(jìn)行氣體交換。
將培養(yǎng)容器放回培養(yǎng)箱(37°C,5% CO2/95% 空氣)。
為了獲得最佳結(jié)果,培養(yǎng)開始后至少 16 小時(shí)內(nèi)不要擾動(dòng)培養(yǎng)。第二天刷新培養(yǎng)基以去除殘留的 DMSO 和未貼壁的細(xì)胞(除非產(chǎn)品表上另有說明)。
A. 建議在 T-25 燒瓶中添加 5 ml 培養(yǎng)基,在 T-75 燒瓶中添加 15 ml 培養(yǎng)基,在 T-150 燒瓶中添加 30 ml 培養(yǎng)基。
答:請(qǐng)參閱您正在使用的細(xì)胞類型的產(chǎn)品表以獲取具體說明。一般來說,根據(jù)細(xì)胞的融合情況,每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基。注意:冷凍保存的細(xì)胞解凍并鋪板后,應(yīng)在約 16 小時(shí)后進(jìn)行第一次培養(yǎng)基更換,以去除 DMSO 殘留和死細(xì)胞。
答:這取決于細(xì)胞類型。例如,內(nèi)皮細(xì)胞永遠(yuǎn)不應(yīng)該變得太匯合(90%-100%),因?yàn)檫@會(huì)促進(jìn)污染細(xì)胞的生長(zhǎng)并導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞衰老。另一方面,成纖維細(xì)胞可以在較高的匯合度(90%-98%)下進(jìn)行傳代培養(yǎng),并且不會(huì)受到較高匯合度的不利影響。一般來說,原代細(xì)胞不應(yīng)該變得太匯合,因?yàn)檫@會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞衰老并促進(jìn)污染細(xì)胞的生長(zhǎng)。
答:ScienCell 研究實(shí)驗(yàn)室不推薦正常細(xì)胞的分流比,因?yàn)橐鹊鞍酌赶蟮募?xì)胞數(shù)量各不相同。我們建議在胰蛋白酶消化后對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),并按照產(chǎn)品表上針對(duì)特定細(xì)胞類型推薦的接種密度接種細(xì)胞。
答:群體倍增是指培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)增加兩倍,最常在指數(shù)或“對(duì)數(shù)"生長(zhǎng)階段提及。術(shù)語傳代次數(shù)是指將細(xì)胞群從培養(yǎng)容器中取出并進(jìn)行傳代培養(yǎng)(傳代)過程的次數(shù),以保持細(xì)胞處于足夠低的密度以刺激進(jìn)一步生長(zhǎng)。
答:ScienCell 不使用術(shù)語“傳代"來描述增長(zhǎng)潛力,因?yàn)槊總€(gè)客戶使用不同的分流比。ScienCell 研究實(shí)驗(yàn)室在細(xì)胞產(chǎn)品表上標(biāo)出了預(yù)期的群體倍增次數(shù)。
A. 非增殖細(xì)胞不能進(jìn)行傳代培養(yǎng),因?yàn)樗鼈儾辉鲋?。這包括以下細(xì)胞類型:神經(jīng)元、小膠質(zhì)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和其他一些細(xì)胞類型。產(chǎn)品表將表明細(xì)胞是否不增殖。
答:我們不建議客戶重新冷凍 ScienCell 的人類和動(dòng)物原代細(xì)胞。
北京和一生物科技有限公司專業(yè)代理antibodiesinc全系列產(chǎn)品,專營(yíng)進(jìn)口生物試劑,科學(xué)儀器,實(shí)驗(yàn)消耗品,化工原料及藥物中間體等。公司與諸多國(guó)外品牌簽下代理,sigma、santa、RD、Abcam、CST、toxin、streck、Biolegend、ebioscience、saracare、polyplus、Beyotime、Novus、moltox等,能為廣大科研用戶提供數(shù)萬種試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)消耗品。
我們公司的優(yōu)勢(shì):
1:與500多家公司合作,基本什么品牌都能進(jìn)口,包括血清,抗體,耗材,還有部分限制進(jìn)口的
2:部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,物流穩(wěn)定
3:一手貨源,價(jià)格價(jià)格優(yōu),售后齊全,歡迎新老客戶咨詢訂購(gòu)