Cosmobio水凝膠
◆ 物理特性
● 當(dāng)溫度高于37℃,甚至高于60℃時(shí),水凝膠將會(huì)發(fā)生什么變化?
隨溫度升高水凝膠將會(huì)變硬。
● 在0-60℃溫度范圍內(nèi),溶膠/凝膠/水凝膠發(fā)生相態(tài)變化的溫度范圍分別是多少?凝膠相可逆變化的溫度范圍是多少?
0℃-15℃:溶膠
15℃-20℃:溶膠和凝膠的中間體
20℃:相態(tài)變化的溫度轉(zhuǎn)折點(diǎn)
20℃以上:水凝膠
37℃以上:隨溫度升高,水凝膠開始變硬。
● 二氧化碳和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是如何供給細(xì)胞的?在水凝膠狀態(tài)下可以溶解到細(xì)胞內(nèi)嗎?
可以的,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和二氧化碳在水凝膠中通過多層營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞。
水凝膠上沒有任何空隙或小孔。
● 凝膠對(duì)二氧化碳、氮?dú)夂脱鯕馐强蓾B透的嗎?
是的,二氧化碳、氮?dú)夂脱鯕獾目梢酝ㄟ^凝膠滲透。
● 當(dāng)Mebiol Gel®處于水凝膠狀態(tài)時(shí),細(xì)胞會(huì)被水凝膠包圍,那有足夠的空間供細(xì)胞生長(zhǎng)嗎?
即使當(dāng)Mebiol Gel®處于凝膠狀態(tài)即37℃時(shí),其交聯(lián)點(diǎn)也是可變的,即會(huì)隨細(xì)胞形態(tài)的變化而變化,且沒有空隙或間隙。
● 在適當(dāng)?shù)臏囟认拢琈ebiol Gel®從溶膠變成凝膠需要多長(zhǎng)時(shí)間?
3分鐘
● 溶膠-凝膠的轉(zhuǎn)換可以重復(fù)多少次?
正常情況下溶膠-凝膠相互轉(zhuǎn)換可重復(fù)多次,直到Mebiol Gel®被化學(xué)分解。另外,溶膠-凝膠相互轉(zhuǎn)換的次數(shù)取決于稀釋后的儲(chǔ)存溫度或氧密度。稀釋后若置于4℃儲(chǔ)存,Mebiol Gel®可穩(wěn)定1-2個(gè)月的時(shí)間,若分裝后置于-20℃或-80℃儲(chǔ)存,則可穩(wěn)定更長(zhǎng)的時(shí)間。
● 多大分子量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可通過凝膠?營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的移動(dòng)距離與分子量之間有什么相關(guān)性呢?
可通過37℃水凝膠擴(kuò)散的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的最大分子量約為10000‐90000(確切尺寸未知)。如果營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分子量為數(shù)千,即1000-9000,在凝膠中擴(kuò)散是沒有問題的。但如果營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的分子量超過9000,那在擴(kuò)散的時(shí)就有問題了。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)自身的分子量越小,在水凝膠中移動(dòng)的距離就越長(zhǎng)。
● Mebiol Gel®最小凝膠質(zhì)量分?jǐn)?shù)(wt%)是多少?
最小的膠濃度大概是7 wt%。Cosmobio推薦加1 g的聚合物至10 g培養(yǎng)基中,這樣制出來的膠濃度為9 wt%
◆ Mebiol Gel®和兼容的細(xì)胞類型問題
● 當(dāng)在37℃下培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),是否可以交換培養(yǎng)基的類型?
當(dāng)處于37℃時(shí),凝膠不會(huì)溶于過量的水。因此,您可以將凝膠上的培養(yǎng)基分層,這樣就可以交換分層后的培養(yǎng)基。
● 當(dāng)細(xì)胞在生長(zhǎng)過程中接觸到水凝膠的邊緣時(shí)會(huì)受到任何阻力嗎?
不會(huì)。
● Mebiol Gel®是否適用于T細(xì)胞或MSC細(xì)胞的培養(yǎng)?
Cosmobio沒有任何關(guān)于在Mebiol Gel®中培養(yǎng)T細(xì)胞的數(shù)據(jù)。關(guān)于MSC細(xì)胞培養(yǎng),請(qǐng)參考以下的參考文獻(xiàn):
Yuguo Lei et al., PNAS PLUS E5039E5048 doi: 10.1073/pnas.1309408110
● 請(qǐng)問可以使用Mebiol Gel®培養(yǎng)人肺上皮細(xì)胞嗎?是否可以提供相關(guān)的參考數(shù)據(jù)?
非常抱歉,Cosmobio沒有任何關(guān)于使用Mebiol Gel®培養(yǎng)人肺上皮細(xì)胞的數(shù)據(jù)。
● Mebiol Gel®是否已經(jīng)被報(bào)道用于培養(yǎng)腸細(xì)胞?是否有可支持的參考文獻(xiàn)?
非常抱歉,Cosmobio沒有任何關(guān)于使用Mebiol Gel®培養(yǎng)腸細(xì)胞的數(shù)據(jù)。
● 在溶液狀態(tài)下,提取細(xì)胞時(shí)是否會(huì)損傷細(xì)胞?
不會(huì)的。
● Mebiol Gel®是否可被用于流式細(xì)胞術(shù)?如果可以的話應(yīng)該使用哪種狀態(tài)的凝膠?
可以的,當(dāng)Mebiol Gel®在低溫下處于溶膠狀態(tài)是可以被用于流式細(xì)胞術(shù)。
● Mebiol Gel®是否可被用于體內(nèi)實(shí)驗(yàn)?如果可以的話,它可以在小鼠體內(nèi)保留多長(zhǎng)時(shí)間?
可以的,Mebiol Gel®可以被用于除人以外的其他物種的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。它可以以凝膠的形式在大鼠腦內(nèi)保留至少28天。更多的信息可以參考以下的參考文獻(xiàn):
T. Ozeki, K. Hashizawa, D. Kaneko, Y. Imai, H. Okada, “Treatment of rat brain tumors using sustained-release of camptothecin from poly(lactic-co-glycolic acid) microspheres in a thermoreversible hydrogel", Chem. Pharm. Bull. 58 (9), 1142-1147 (2010)
● Mebiol Gel®對(duì)細(xì)胞具有毒性嗎?如果有的話,對(duì)哪些類型的細(xì)胞可能會(huì)產(chǎn)生毒害作用?
Mebiol Gel®對(duì)所有的細(xì)胞均是無毒的。
● 有關(guān)于使用Mebiol Gel®培養(yǎng)正?;虬┳兊募谞钕偌?xì)胞的參考文獻(xiàn)嗎?
有的,請(qǐng)參考以下已發(fā)表文獻(xiàn):
Production of hepatitis C viruses (HCV) by 3-D culture of human hepatocyte cell line? “Production of infectious hepatitis C virus particles in three-dimensional cultures of the cell line carrying the genome-length dicistronic viral RNA of genotype 1b“ Virology, 351 (2), 381-392 (2006)
◆ 其他問題
● Mebiol Gel®可以室溫儲(chǔ)存嗎?
可以的,粉末狀的Mebiol Gel®應(yīng)置于室溫儲(chǔ)存。
● Mebiol Gel®的有效期是多久?
Mebiol Gel®的有效期為發(fā)貨之日起一年。
● Mebiol Gel®一次性未能用完,若將剩余的凝膠置于4℃儲(chǔ)存,可儲(chǔ)存多長(zhǎng)時(shí)間?
大約一個(gè)月的時(shí)間,若要長(zhǎng)期儲(chǔ)存,請(qǐng)置于-20℃或-80℃。
● Cosmobio可以提供Mebiol Gel®的試用裝嗎?
非常抱歉,Cosmobio不提供Mebiol Gel®的試用裝。
● Cosmobio如何對(duì)Mebiol Gel®進(jìn)行消毒?凝膠里會(huì)有一些活體生物嗎?
Cosmobio使用EOG對(duì)凝膠進(jìn)行消毒,凝膠里應(yīng)該不含任何生物。
● 當(dāng)使用10 mL和50 mL的Mebiol Gel®培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),應(yīng)該使用多大規(guī)格的培養(yǎng)瓶?
應(yīng)分別使用T-25和T-75的培養(yǎng)瓶。
● 當(dāng)重懸Mebiol Gel®時(shí),可以使用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的Mebiol Gel®作為儲(chǔ)存原液,而非10%嗎?因?yàn)槲蚁M诤罄m(xù)的實(shí)驗(yàn)中使用其他類型的培養(yǎng)基去進(jìn)一步稀釋。
可以使用20%的Mebiol Gel®代替10%的作為儲(chǔ)存原液。但是,請(qǐng)注意20%的高濃度重懸液具有很高的粘度,即使在低溫下也具有較低的流動(dòng)性。
● 說明書中推薦使用10 mL的培養(yǎng)基溶解Mebiol Gel® (MBG-PMW20-1001)??梢允褂酶篌w積的培養(yǎng)基去溶解嗎?
一般情況下,Cosmobio推薦使用10 mL的培養(yǎng)基溶解10 mL的Mebiol Gel®。如果您希望溶解50 mL的Mebiol Gel®,則需要加入50 mL的培養(yǎng)基。如果低于這個(gè)濃度的Mebiol Gel®溶液,則很難形成凝膠。例如,如果您使用20 mL的培養(yǎng)基去溶解10 mL的Mebiol Gel®,則很難獲得凝膠。
● 每瓶中含有多少克的Mebiol Gel®?
10 mL規(guī)格的Mebiol Gel®溶液中含有1.0 g的Mebiol Gel®,50 mL的Mebiol Gel®溶液中含有5.0 g的Mebiol Gel®。
● 包裝瓶中的粉色藥片是什么?
是氧氣檢測(cè)試劑。與Mebiol Gel®一起,作為氧氣和水分的吸收劑,但非產(chǎn)品的一部分。
● 可以制備的Mebiol Gel®凝膠濃度最高是多少?
最高濃度大約為15 wt%。如果濃度再高,其黏性會(huì)隨著濃度的升高而增大,進(jìn)而導(dǎo)致Mebiol Gel®即使在低溫狀態(tài)下也無法使用,例如在20 wt%濃度下就已經(jīng)無法使用
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