分子生物試劑是細胞內(nèi)活性分析所需的物質(zhì),通常在樣品制備過程中使用,高質(zhì)量的混合物可以有效地處理細胞成分,從而提高顯微鏡觀察的可行性。分子生物學是生物科學的一個分支,涉及細胞各種系統(tǒng)中生物分子之間的生物學活性的分子基礎,包括DNA,RNA,蛋白質(zhì)及其生物合成之間的相互作用以及這些相互作用的調(diào)控。分子生物學過程使用的試劑也可以統(tǒng)稱為為分子試劑。
有關一些核酸提取類分子生物試劑的配制說明:
1.10%十二烷基硫酸鈉(SDS)溶液
配制量:100mL。
配制方法:在90mL無菌水中溶解10g電泳級SDS,加熱至68助溶,加入幾滴濃鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.2,加水定容至1L,分裝備用。
注意事項:
?、賁DS的微細晶粒易擴散,因此稱量時要戴面罩,稱量完畢后要清除殘留在稱量工作區(qū)和天平上的SDS,10%SDS溶液無須滅菌(高溫條件下分解會產(chǎn)生CO等有毒氣體);
②若有沉淀形成,可以適當水浴加熱溶解后繼續(xù)使用;
?、蹍^(qū)別于十二烷基磺酸鈉;
④pH極易調(diào)過需小心。
2.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)處理水
配制量:1L。
配制方法:加1mL DEPC于999ml水中,用磁力攪拌器在37條件下攪拌4h以上,靜置過夜,在121條件下高溫滅菌20min,以使殘余的DEPC失活。
注意事項:
①DEPC具有強烈的致癌性,故操作時必須戴雙層口罩,雙層手套于通風廚中進行;
?、诖颂幣渲频腄EPC水用于RNA提取中70%乙醇的配制及RNA的溶解。